1、颈椎脱臼法处死小鼠。解剖小鼠腹部。扒开内脏，可看到如图所示的长约3-4厘米呈长条状的深红色组织，即为脾脏；
2、将分离得到的脾脏组织浸泡在干净的PBS溶液中；
3、在一个培养皿中加入适量的PBS溶液，放一个细胞筛，将脾脏取出放于细胞筛中。取干净的注射器，用其按压处的末端对组织进行碾压。膜内细胞会慢慢游离出来，经过细胞筛之后，悬浮在培养皿溶液中；
4、洗一洗细胞筛，收集细胞筛外PBS，400g, 50ml离心管离心，15min；
5、去上清，加红细胞裂解液2ml，重悬。37度2min；
6、离心400g，15min，PBS 5ml洗一遍，离心400g，除去上清；
7、细胞培养基重悬5ml，除去其中不可溶的组织纤维，悬浮液取100ul细胞计数；
8、稀释细胞，培养或者铺板。